一、什么是細(xì)胞培養(yǎng)基

細(xì)胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基，既是供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境，一般是鹽、碳水化合物、維生素、氨基酸、代謝前體、生長(zhǎng)因子、激素和微量元素的復(fù)雜混合物。

二、常用的細(xì)胞培養(yǎng)基有哪些

細(xì)胞培養(yǎng)基的種類眾多，由于不同細(xì)胞系對(duì)這些成分的要求各不相同，因此產(chǎn)生了不同類型的培養(yǎng)基，常用的細(xì)胞培養(yǎng)基主要有：

1、MEM培養(yǎng)基

是一種添加了營(yíng)養(yǎng)物的最低必需培養(yǎng)基，僅含有12種必需氨基酸、L-谷氨酰胺和8種維生素，含糖量為1g/L。MEM是一種最基礎(chǔ)、最常用的細(xì)胞培養(yǎng)基，主要應(yīng)用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)，在添加血清后，可用于培養(yǎng)多種單層生長(zhǎng)的細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞。修改配方后的a-MEM則可廣泛應(yīng)用于各種哺乳動(dòng)物懸浮和貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。

2、DMEM培養(yǎng)基

氨基酸含量是MEM的兩倍，維生素含量是MEM的4倍，以及硝酸鐵、丙酮酸鈉和一些補(bǔ)充氨基酸。此外，DMEM分為低糖型和高糖型，葡萄糖含量分別為1g/L和4.5g/L。（低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長(zhǎng)速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)；高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，也適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來(lái)生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。）

3、IMDM培養(yǎng)基

用于淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。與DMEM相比，添加了HEPES和硒，硝酸鉀取代了硝酸鐵，并且含有更多的氨基酸、維生素和無(wú)機(jī)鹽。

4、Ham 's F-12K培養(yǎng)基

用于支持原代細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。F-12K增加了氨基酸、丙酮酸、生物素、鈣、鎂、腐胺和酚紅的含量。

5、DMEM/F12培養(yǎng)基

DMEM和F12的1:1混合物，能夠在低血清條件下支持多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，在此培養(yǎng)基中成功培養(yǎng)的細(xì)胞包括：MDCK、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和人內(nèi)皮細(xì)胞等。

6、McCoy’s 5A培養(yǎng)基

廣泛用于多種原代細(xì)胞及細(xì)胞系的培養(yǎng)，如來(lái)源于骨髓、皮膚、脾臟、腎臟和肺等組織的哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞。

7、RPMI-1640培養(yǎng)基

是在McCoy’5A的基礎(chǔ)上進(jìn)行改良研發(fā)出的，最初用于人白血病細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)，后來(lái)發(fā)現(xiàn)也適用于HeLa、MCF-7、PC12、外周血單核細(xì)胞（B/T淋巴細(xì)胞）和星形細(xì)胞的培養(yǎng)。RPMI 1640與其它培養(yǎng)基的區(qū)別是含有還原型谷胱甘肽和高濃度維生素。此外還含有含有MEM、DMEM中不含的生物素、維生素B12和對(duì)氨基苯。

8、L15培養(yǎng)基

L-15培養(yǎng)基的配方中不含用于CO2平衡環(huán)境的碳酸鹽緩沖系統(tǒng), 而是用磷酸鹽、L-精氨酸、L-組氨酸和 L-半胱氨酸作為緩沖劑。用半乳糖和丙酮酸鈉代替葡萄糖以防止乳酸的形成。可以在無(wú)CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，或者擰緊瓶蓋培養(yǎng)。

三、細(xì)胞培養(yǎng)基的品質(zhì)要求

細(xì)胞培養(yǎng)基有多種，不同種類的細(xì)胞培養(yǎng)基用于培養(yǎng)不同細(xì)胞，一般來(lái)說(shuō)，好的細(xì)胞培養(yǎng)基，需要滿足以下幾點(diǎn)要求：

1、外觀

顏色、粉末細(xì)度須均勻。

2、溶解性

培養(yǎng)基完全溶解，可以避免培養(yǎng)基內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的流失。

3、pH值

哺乳類動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)需要合適的酸堿度，同時(shí)pH值的測(cè)定也可以檢查培養(yǎng)基的批間差異。

4、水分

培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成份很豐富，利于微生物的滋長(zhǎng)，因此水分的含量控制可以延長(zhǎng)有效期。

5、冰點(diǎn)滲透壓

細(xì)胞必須生活在合適的滲透壓環(huán)境中，同時(shí)滲透壓值的測(cè)定也可以檢查培養(yǎng)基的批間差異。

6、菌落總數(shù)

粉末培養(yǎng)基不是無(wú)菌制劑，培養(yǎng)基本身的營(yíng)養(yǎng)成分很豐富，容易滋生微生物，因此菌落的控制可以延長(zhǎng)有效期

7、細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)

可檢查細(xì)胞培養(yǎng)基是否有促生長(zhǎng)的能力，以及是否有不利細(xì)胞生長(zhǎng)的毒素。

8、細(xì)菌內(nèi)毒素

為滿足生物制品細(xì)菌內(nèi)毒素的控制要求，作為生物制品生產(chǎn)原料的培養(yǎng)基同樣需要細(xì)菌內(nèi)毒素控制。

9、穩(wěn)定性

確定產(chǎn)品的儲(chǔ)存、運(yùn)輸條件，產(chǎn)品的保質(zhì)期限。

10、一致性

驗(yàn)證產(chǎn)品的均一性。